ప్రకాశం సూక్ష్మదర్శిని: పద్ధతి సూత్రాలను

కాంతి మరింత సేంద్రీయ మరియు అసేంద్రీయ ద్రవాలు శోషణ మరియు తిరిగి ఉద్గార phosphorescence లేదా కాంతిలో ఫలితం. దృగ్విషయం మధ్య తేడా కాంతి ధార శోషణ మరియు ఉద్గార మధ్య విరామం వ్యవధి ఉంది. ఈ ప్రక్రియల ప్రతిదీప్తి, దాదాపు ఏకకాలంలో సంభవించినప్పుడు phosphorescence అయితే - కొన్ని ఆలస్యం.

చారిత్రక సమాచారం

1852 లో, బ్రిటీష్ శాస్త్రవేత్త స్టోక్స్, మొదటి ప్రతిదీప్తి వివరించారు. అతను ప్రయోగాలు ఫలితంగా ఒక కొత్త పదం పరిచయం fluorspar, అతినీలలోహిత కాంతి కింద ఎరుపు కాంతి వెలువరించే. స్టోక్స్ ఒక ఆసక్తికరమైన దృగ్విషయం గుర్తించారు. ఇది ఫ్లోరోసెంట్ వికిరణం యొక్క తరంగదైర్ఘ్యం ఎల్లప్పుడూ ప్రేరణ కాంతి ప్రవాహాన్ని కన్నా ఎక్కువ అని కనుగొనబడింది.

19 వ శతాబ్దంలో పరికల్పన నిర్ధారించడానికి అనేక ప్రయోగాలు ఉన్నాయి. వారు నమూనాలను వివిధ అతినీలలోహిత కాంతి ప్రభావంతో ఫ్లూరోస్స్కు తేలింది. అంశాల్లో, ఇతర విషయాలు, ఉన్నాయి స్పటికాలు, రెసిన్లు, ఖనిజాలు, పత్రహరితాన్ని, క్రూడ్ డ్రగ్స్, అకర్బన సమ్మేళనాలను విటమిన్లు, నూనెలు మధ్య. జీవ పరీక్షలు కోసం రంగులు ప్రత్యక్ష ఉపయోగం మాత్రమే 1930 లో ప్రారంభమైంది,

ప్రకాశం సూక్ష్మదర్శిని: వివరణ

20 వ శతాబ్దం అధ్యయనాలు మొదటి సగం లో ఉపయోగించే వస్తువులు కొన్ని అధిక నిర్దిష్టత ప్రదర్శించాడు. стал важнейшим инструментом и в биомедицинских, и в биологических исследованиях. పద్ధతులు విభిన్న ద్వారా సాధించవచ్చు కాలేదు, ఇది పనితీరు, ధన్యవాదాలు, ప్రతిదీప్తి సూక్ష్మదర్శిని యొక్క పద్ధతి జీవవైద్య మరియు జీవ పరిశోధనలో ఒక ముఖ్యమైన సాధనంగా మారింది. సమానంగా ముఖ్యమైన ఫలితాలు పొందిన, మరియు పదార్థాలకు చేశారు.

? ఏం ప్రయోజనాలు ప్రతిదీప్తి సూక్ష్మదర్శిని యొక్క పద్ధతి చేస్తుంది? కొత్త పదార్థాల ఉపయోగం సాధ్యం మారింది మరియు అత్యంత నిర్దిష్ట సెల్ submicroscopic భాగాలు ఎంపిక చేసింది. ప్రకాశం సూక్ష్మదర్శిని ఒంటరి పరమాణువులను గుర్తించగలదు. రంగులు వివిధ ఒకేసారి బహుళ వస్తువులను గుర్తించేందుకు అనుమతిస్తుంది. పరికరాలు, ఇది క్రమంగా, నమూనా యొక్క నిర్దిష్ట లక్షణాలు ఆధారపడి వివర్తనం పరిమితి పరిమిత ప్రాదేశిక రిజల్యూషన్ ఉన్నప్పటికీ, ఈ స్థాయి క్రింద అణువుల గుర్తింపు కూడా చాలా అవకాశం ఉంది. వికిరణం ప్రదర్శన autofluorescence తరువాత వివిధ నమూనాలను. ఈ దృగ్విషయం విస్తృతంగా పెట్రోలజీ, వృక్షశాస్త్రం, సెమీకండక్టర్ పరిశ్రమలో ఉపయోగిస్తారు.

ఫీచర్స్

జంతు కణజాలం లేదా తరచుగా సమస్యాత్మక లేదా చాలా బలహీనంగా లేదా చాలా బలమైన మాత్రం వెల్లడి autofluorescence వ్యాధికారక అధ్యయనం. అయితే, అధ్యయనాలు సూచించిన విలువ ఒక నిర్దిష్ట తరంగదైర్ఘ్యం వద్ద సంతోషిస్తున్నాము పదార్థం భాగాలుగా పరిచయం మరియు అవసరమైన కాంతి ప్రవాహం తీవ్రత వెలువరించే పొందుతాయి. Fluorochromes నిర్మాణాలు (కనిపించే లేదా అదృశ్య) జత స్వతంత్రంగా సామర్థ్యం రంగులు పనిచేస్తాయి. అందుచే వారు లక్ష్యం అధిక ప్రత్యేకతకు, మరియు క్వాంటం దిగుబడి.

стала широко применяться с появлением естественных и синтетических красителей. ప్రకాశం సూక్ష్మదర్శిని విస్తృతంగా సహజ మరియు సింథటిక్ రంగులు రావడంతో నుండి వాడుతున్నారు. వారు ప్రసరణ మరియు ఉత్తేజన కొంత తీవ్ర ప్రొఫైల్స్ కలిగి మరియు నిర్దిష్ట జీవ లక్ష్యాలను లక్ష్యంగా చేసుకుంది.

వ్యక్తిగత అణువుల గుర్తింపు

తరచుగా, ఆదర్శ పరిస్థితుల్లో, మీరు ఒక ప్రత్యేక మూలకం మిణుగురు నమోదు చేయవచ్చు. ఈ కోసం, ఇతర విషయాలతోపాటు, అది డిటెక్టర్ మరియు ఆప్టికల్ నేపథ్య ఒక తగినంత తక్కువ శబ్దం అందిస్తుంది. కారణంగా photobleaching 300 వేల. ఫోటాన్లు వెలువరిస్తుంది వైఫల్యం Fluorescein అణువు. ప్రక్రియ యొక్క 20% సేకరణకు సామర్థ్యం మరియు సుమారు 60 వేల మొత్తంలో వాటిని నమోదు చేయవచ్చు.

, основанная на лавинных фотодиодах или электронном умножении, позволяла исследователям наблюдать поведение отдельных молекул на протяжении секунд, а в ряде случаев и минут. ఆకస్మిక photodiodes లేదా ఎలక్ట్రానిక్ గుణకారం ఆధారంగా ఫ్లోరసెన్సు మైక్రోస్కోపీ పరిశోధకులు అప్రధాన ద్వారా వ్యక్తిగత అణువులు యొక్క ప్రవర్తన గమనించి అనుమతి, మరియు కొన్ని సందర్భాలలో కూడా నిమిషాలు.

సంక్లిష్టత

ఆప్టికల్ శబ్దం నేపథ్య అణిచివేత అనుకూలంగా కీలకమైన విషయం. కారణంగా ఫిల్టర్లు మరియు కటకములు కొంత autofluorescence ప్రదర్శిస్తాయి రూపొందించేవారు పదార్థాలు అనేక ప్రాధమిక దశలలో శాస్త్రవేత్తలు ప్రయత్నాలు తక్కువ కాంతిలో కలిగి భాగాలను ఉత్పత్తిలో ఆధారిత నిజాన్ని పెట్టుబడిదార్లు. ఏది ఏమయినప్పటికీ, తరువాత ప్రయోగాలు కొత్త ముగింపులు దారితీసింది. , основанная на полном внутреннем отражении, позволяет достичь низкого фона и высокоинтенсивного возбуждающего светового потока. ముఖ్యంగా, ఇది ప్రతిదీప్తి సూక్ష్మదర్శిని, మొత్తం అంతర్గత ప్రతిబింబం ఆధారంగా అది ఒక తక్కువ నేపథ్యం మరియు ఉన్నత తీవ్రత ప్రేరణ కాంతి సాధించడానికి అనుమతిస్తుంది తేలింది.

విధానం

, основанной на полном внутреннем отражении, заключаются в использовании быстрозатухающей или нераспространяющейся волны. మొత్తం అంతర్గత ప్రతిబింబం ఆధారంగా ప్రతిదీప్తి సూక్ష్మదర్శిని యొక్క సూత్రాలు, ఎవానెసెంట్ వేవ్ లేదా ఎవానెసెంట్ ఉపయోగించడం. ఇది వివిధ మీడియా మధ్య సరిహద్దు వద్ద జరుగుతుంది రిఫ్రాక్టివ్ సూచీలు. ఈ సందర్భంలో, కాంతి పుంజం పట్టకం ద్వారా వెళుతుంది. ఇది ఒక అత్యధిక వక్రీభవన సూచిక పరామితి ఉంది.

తక్కువ పరామితి సజల ద్రావణంలో లేదా గాజు ప్రక్కనే పట్టకం. మరింత క్లిష్టమైన అని ఒక కోణంలో అది వద్ద దర్శకత్వం కాంతి పుంజం ఉంటే, పుంజం పూర్తిగా ఇంటర్ఫేస్ నుండి ప్రతిబింబిస్తుంది. ఈ దృగ్విషయం, క్రమంగా, nonpropagating తరంగాలు కారణమవుతుంది. ఇతర మాటలలో, ఉత్పత్తి విద్యుదయస్కాంత రంగంలో ఒక దూరం కంటే తక్కువ 200 నానోమీటర్ల ఒక తక్కువ రిఫ్రాక్టివ్ ఇండెక్స్ పరామితి ఒక మాధ్యమంగా చొచ్చుకొచ్చే ఇది.

ఎవానెసెంట్ వేవ్ కాంతి తీవ్రత fluorophores ఉత్తేజపర్చడానికి చేయొచ్చు. అయితే, ఎందుకంటే దాని చాలా చిన్న లోతు, దాని వాల్యూమ్ చాలా చిన్న ఉంటుంది. ఫలితంగా ఒక తక్కువ స్థాయి నేపథ్యం ఉంది.

మార్పు

ప్రకాశం సూక్ష్మదర్శిని మొత్తం అంతర్గత ప్రతిబింబం ఆధారంగా, ఎపి ప్రకాశం తో అమలు చేయవచ్చు. ఈ అధిక సంఖ్యా ఎపర్చరు కటకములు అవసరం (కనీసం 1.4, కానీ అది 1.45-1.6 చేరిన కావాల్సిన ఉంది), మరియు పాక్షికంగా రంగంలో ఉపకరణం ప్రకాశించే. రెండో ఒక చిన్న స్పాట్ పరిమాణం తో సాధించవచ్చు. ఎక్కువ ఏకరూపత ప్రవాహంలో ఒక భాగం అడ్డుకుంటారు ఒక సన్నని రింగ్ ఉపయోగించి. మొత్తం ప్రతిబింబం ఉంది, దీని తరువాత క్లిష్టమైన కోణం కోసం, మేము లెన్స్ ఇమ్మర్షన్ మాధ్యమం మరియు సూక్ష్మదర్శిని యొక్క కవర్ గాజు వక్రీభవనం యొక్క అధిక స్థాయి అవసరం.